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人骨髓间充质干细胞对树突状细胞免疫功能的影响

【摘要】:最近研究表明MSC能抑制细胞或有丝分裂原引起的T细胞增殖,虽然MSC对T细胞具有直接的负调控能力,但MSC对免疫反应的始动者DC是否也具有免疫调控作用国内外均未见报道。本课题就此展开深入探讨。 首先,从人骨髓中分离培养间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),并从形态、表型和分化功能三个方面进行鉴定。通过混合淋巴细胞反应和淋巴母细胞转化实验证明MSC可抑制异体T细胞的增殖,且随MSC的量的增加,这种抑制能力增强。其次,利用免疫磁珠法从外周血分离CD14+单核细胞,GM-CSF+IL-4+TNF-α诱导树突状细胞(dendritic cell,DC),同样从形态、表型和功能三个方面鉴定。最后,探讨MSC对DC生物学特性的影响,结果表明MSC抑制DC的发育、成熟和功能。在DC的诱导体系中,MSC抑制CD14+单核细胞向DC的分化。细胞间接触和可溶性分子均参与MSC对DC发育的负调控,且细胞间接触发挥更大作用。进一步,利用中和实验探讨对DC生成起重要作用的IL-6和M-CSF在有MSC参与的共培养体系中的作用。结果表明,虽然MSC分泌IL-6和M-CSF,但中和实验显示,IL-6和M-CSF不是唯一参与MSC抑制CD14+细胞向DC分化的细胞因子,加入二者的中和抗体并未逆转MSC对DC生成的抑制,说明MSC还分泌某些未知因子参与MSC对DC发育的调控。MSC抑制CD14+细胞向DC的分化是可逆的,与MSC分开后,细胞在正常DC诱导体系仍能分化为DC,说明DC对微环境的依赖性。MSC还抑制已定向分化的DC的成熟和功能,降低DC表面共刺激分子的表达,抑制DC分泌IL-12的能力以及DC刺激T细胞增殖的能力。 以上结果首次证明MSC对DC具有负调控作用,为进一步的体内实验及研究MSC的免疫调控能力提供新思路。

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