收藏本站

耐受性树突状细胞来源的exosome治疗小鼠免疫介导性再生障碍性贫血的实验研究

【摘要】: 目的:分离纯化耐受性树突状细胞(tolerogenic dendritic cells, tDCs)来源的exosome(tDex),探索其对免疫介导性再生障碍性贫血模型小鼠造血功能的影响及其在免疫调节中的作用。 方法:采用雌性Balb/c小鼠为供体,雌性昆明小鼠为受体。取供体小鼠骨髓细胞,分离单个核细胞。在含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中加入GM-CSF 20ng/ml+VIP 40ng/ml +DXM 10ng/ml进行体外诱导培养;收集上清液,经超速离心分离纯化tDex,Bradford法进行蛋白定量。光镜下动态观察tDCs细胞形态,电镜下观察tDex形态,流式细胞术检测tDCs和tDex CD80、CD86、CD40、CD11c、Fas-L表达。MTT法检测tDex刺激淋巴细胞增殖活性。共120只小鼠随机分为下列各组:1)正常对照组:为正常小鼠不做任何处理;2)模型组:昆明小鼠经X射线亚致死量(7Gy)全身均匀照射后,于4小时内自尾静脉输入Balb/c小鼠的胸腺淋巴结细胞1×106/只;3) tDCs组:制模后当天输注tDCs1×106/只;4)tDex 1组:a:tDex 5ug/只,b:tDex 10ug/只,c:tDex 20ug/只;5)tDex 2组分别于d0,d3,d7天输入tDex 8ug/只。动态观察小鼠外周血细胞变化,小鼠濒死时(或制模后第28天),取股骨行骨髓病理切片观察,计数单侧股骨骨髓有核细胞数,甲基纤维素半固体培养法测定CFU–GM集落数,流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞CD3+CD8+、CD3+HLA-DR+、CD4+CD25+、Foxp3+T细胞、Th1/Th2辅助性T细胞的表达,实时荧光定量PCR检测T-bet、GATA-3基因表达。 结果: 1.tDex与tDCs比较,CD11c、CD80、CD86,Fas-L均无显著性差异(P0.05);tDex组CD40、MHC-Ⅱ表达均低于tDCs组(P0.05)。 2.淋巴细胞增殖活性测定:tDCs与tDex对于淋巴细胞均有抑制细胞增殖活性的作用,tDex与tDCs联合使用比单用tDCs抑制作用更加明显(P0.05);单用tDex组内,tDex浓度越高,其抑制作用越强;tDex作用72小时比48小时的抑制活性更强,提示tDex的抑制活性与时间、剂量成正比。 3.输注tDCs组、tDex5ug及第3天输注tDex 8ug组小鼠较模型组造血功能明显改善,制模后第28天生存率较模型组高。与模型组比较,外周血白细胞及血小板数2周后持续上升,单侧股骨骨髓有核细胞数及CFU–GM集落数明显增多(P0.05)。骨髓病理切片显示:骨髓增生活跃,造血细胞增加,可见少量脂肪细胞填充骨髓腔。脾淋巴细胞CD3+CD8+T细胞明显低于模型组, CD4+CD25+、Foxp3+T细胞明显高于模型组、Th1/Th2辅助性T细胞的比值较模型组明显降低,CD3+HLA-DR+差别无显著统计学意义, T-bet/GATA-3基因表达较模型组明显下降(P0.05)。 结论: 1.小鼠骨髓单个核细胞,体外经GM-CSF、VIP、DXM、LPS联合诱导培养生成耐受性树突状细胞(tDCs),经超速离心纯化可获得exosome; 2.tDex与tDCs具有相似的诱导免疫耐受特性; 3.来源于体外培养tDCs的tDex输注免疫介导性再生障碍性贫血小鼠体内,可诱导CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞生成,Th1/Th2和T-bet/GATA-3基因表达比例下降,促进小鼠造血功能的恢复。

下载App查看全文

(如何获取全文? 欢迎:、、)

支持CAJ、PDF文件格式


【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 张红梅;张利旺;刘文超;;从抗原提呈细胞到抗原提呈小体[J];医学与哲学(临床决策论坛版);2006年07期
2 耿建;金洁;陈龙邦;;以exosome为基础的肿瘤免疫治疗研究进展[J];医学研究生学报;2006年09期
3 李超;于金录;杨偲;黄海燕;;胶质瘤源性exosome的提取及形态学观察[J];中国实验诊断学;2010年07期
4 朱伟;黄玲;许晓蒙;钱晖;许文荣;王梅;钱海;;人骨髓间质干细胞来源外体的分离鉴定及生物学特性[J];临床检验杂志;2010年05期
5 张家模;吴小候;张尧;夏雨果;罗春丽;;膀胱移行细胞癌来源exosome的制备及相关蛋白分子的鉴定[J];肿瘤防治研究;2010年06期
6 赵丽华;范华骅;;exosome及其在免疫耐受方面的作用[J];生命科学;2007年02期
7 张群;陈龙邦;;Dexosome的生物学特性和临床研究进展[J];临床肿瘤学杂志;2007年12期
8 张尧;吴小候;;Exosome的生物学特性及其在免疫调节中的作用[J];重庆医学;2008年18期
9 向自武;沈宜;汪少华;范维珂;陈黎;;三氧化二砷诱导小鼠肝癌细胞H_(22)外泌exosome及相关机制研究[J];第三军医大学学报;2009年03期
10 金铮;于金录;杨偲;李超;黄海燕;;胶质瘤来源exosome的鉴定及其蛋白质组成研究[J];中国实验诊断学;2010年09期
11 黄波;;肿瘤免疫学的热点与潜在方向——第98届美国免疫学年会相关报道之启示[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2011年04期
12 卜宁;李奇灵;孙秉中;张涛;冯琦;乔庆大;;Exosomes致敏的脐血树突细胞介导的抗K562细胞作用[J];现代肿瘤医学;2006年04期
13 杜嘉瑞;张路遥;杨洪发;别黎;徐惠勇;陈立兵;鞠砚;;胶质瘤细胞来源exosome的鉴定及其蛋白组成研究[J];中国实验诊断学;2008年01期
14 游佳;林锦清;董菁;朱月永;郑琦;陈靖;刘豫瑞;江家骥;;自体树突状细胞来源的Exosome活化HBV携带者PBMCs的体外研究[J];中国病毒病杂志;2011年02期
15 张红梅;张利旺;任军;白俊;刘文超;;树突状细胞-肝癌细胞株HepG2融合细胞来源的exosome抗肝癌效应的实验研究[J];现代肿瘤医学;2006年09期
16 代义;张渊;邱峰;李艳艳;邱宗荫;;非小细胞肺癌患者尿中Exosomes蛋白质组的差异表达分析[J];分析化学;2010年03期
17 卜宁;孙秉中;李奇灵;冯琦;张涛;乔庆大;王一苇;;Exosomes对L1210肿瘤细胞攻击的免疫保护作用研究[J];临床血液学杂志;2006年06期
18 曲晶磊;张文;刘云鹏;曲秀娟;侯科佐;姜又红;杨向红;;PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞来源的Exo-some促进同源肿瘤细胞增殖中的作用[J];世界华人消化杂志;2011年11期
19 池余刚;钟玲;;树突细胞疫苗与卵巢癌免疫治疗的研究进展[J];国际妇产科学杂志;2008年03期
20 沈宜;向自武;陈国庆;谢莹珊;郑维萍;;As_2O_3联合H_(22)源exosome的抗肿瘤作用研究[J];激光杂志;2009年04期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 秦霞;邱峰;;近年来国内外关于exosome研究的文献计量学分析[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
2 张琳;郑桂娜;万宇峰;郭一鸣;魏盼盼;郭金虎;;exosome复合物对生物钟基因表达的转录后调控研究[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
3 张红梅;张利旺;刘文超;任军;;树突状细胞-肝癌细胞株HepG2融合细胞来源的Exosome制备及抗其肝癌免疫活性的实验研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议教育集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 余雪松;口服RDP58肽诱导的Treg源性exosomes抑制大鼠肾移植排斥的研究[D];第三军医大学;2012年
2 黄海燕;胶质瘤及胶质瘤细胞株源exosome的蛋白质组学研究[D];吉林大学;2008年
3 卜宁;慢性髓细胞白血病细胞分泌的exosome的抗白血病作用研究[D];第四军医大学;2006年
4 周红升;新的白血病相关基因CML28的功能研究[D];华中科技大学;2007年
5 张红梅;树突状细胞—肝癌细胞株HepG2融合瘤苗及其来源的Exosome抗肝癌免疫活性的实验研究[D];第四军医大学;2006年
6 彭澎;卵巢癌患者腹水来源exosome对机体抗卵巢癌免疫功能影响的实验研究及其蛋白质组成分析[D];中国协和医科大学;2007年
7 吴尘轩;增强树突状细胞及其相关exosome抗肝癌免疫效应的实验研究[D];天津医科大学;2008年
8 王东关;负载exosome的树突状细胞诱导抗舌鳞癌效应的研究[D];山东大学;2006年
9 张顺华;猪不同泌乳期乳汁Exosome中microRNA转录组的鉴定和表达谱分析[D];四川农业大学;2013年
10 孙爱丽;尿胞外体在糖尿病肾病中的作用研究[D];山东大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 顾丽亚;大鼠骨髓间充质干细胞exosome对自身心肌分化及抗凋亡实验研究[D];苏州大学;2013年
2 孙祯;肠系膜淋巴结固有exosome的制备及其对异体淋巴细胞增殖的影响[D];第三军医大学;2013年
3 亓洪昭;红细胞外泌体为载体靶向肿瘤药物投递研究[D];天津大学;2012年
4 李超;胶质瘤源性exosome的提取及其蛋白组成研究[D];吉林大学;2011年
5 刘善文;大鼠骨髓间充质干细胞exosome提取及其心肌细胞H9C2靶向作用的实验探索[D];山东大学;2013年
6 黄祺琦;耐受性树突状细胞来源的exosome治疗小鼠免疫介导性再生障碍性贫血的实验研究[D];南昌大学;2010年
7 陈磊;BMSCs来源的EXOSOME抗细胞凋亡作用机制研究[D];苏州大学;2013年
8 李建良;胶质瘤来源的Exosome冲击树突状细胞体外诱导特异性CTL的初步研究[D];河北医科大学;2012年
9 张路遥;胶质瘤源性exosome分离和提纯的实验研究[D];吉林大学;2007年
10 田艳华;构建多功能Exosome用于抗肿瘤药物输送及肿瘤靶向治疗[D];吉林大学;2013年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978


{bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育下载}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck体育下载}| {bckbet}| {bcksports}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bck官网}| {bck体育下载}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育app}| {bck体育}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育下载}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bck官网}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育官网}| {bcksports}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bckbet}|
{uc8}| {uc8体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐城}| {uc8彩票}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8老虎机}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8老虎机}| {uc8彩票}| {uc8}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {uc8彩票}| {uc8}| {uc体育}| {UC体育}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}|