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敦煌四时常服方与AD大鼠学习记忆功能的相关性研究

【摘要】:目的:轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)被认为是治疗痴呆的关键时期。本实验研究敦煌四时常服方对AD大鼠学习记忆功能的影响,为敦煌四时常服方改善AD模型大鼠MCI提供研究基础及科学依据。方法:选择清洁级SD雄性大鼠70只,按随机数字分组法分为模型组,四时常服方低、中、高剂量组,阳性药物对照组,假手术组,空白组,每组10只。前6组大鼠海马CA1区分别注射凝聚态Aβ1-42各5μl建立大鼠AD模型。造模7天后灌胃给药28天(每天100ml/kg),模型组与假手术组给予生理盐水,四时常服方组按组别给予不同浓度汤药,阳性药物组给予盐酸多奈哌齐。灌胃结束后分离海马,保存于-18℃。对大鼠学习记忆功能采用Morris水迷宫实验及跳台实验;同时检测各组大鼠生化指标;采用光镜切片研究脑组织细胞形态学;采用流式细胞技术检测海马组织细胞中INOS表达量;用ELISA法检测P35、CDK5、ERK蛋白表达情况。结果:1.模型组及四时常服方组较假手术组和空白组逃避潜伏期均有不同的程度的延长。特别是模型组的逃避潜伏期延长最明显,其余治疗各组逃避潜伏期均有一定程度缩短,而高剂量四时常服方组与模型组比较有显著性差异(P0.05);阳性药物对照组与模型组相比有显著性差异(P0.05),2.模型组潜伏期及错误次数明显大于其余各组,表明模型组大鼠失去对原平台的记忆。而各用药组表现均较模型组有所提高,与模型组相比有显著性差异(P0.05)。3.根据流式细胞技术检测海马组织细胞中INOS表达量,结果表明采用四时常服方及阳性药物均能降低细胞中INOS表达量,从而达到保护细胞的作用。且不同浓度四时常服方组间比较时,高剂量四时常服汤组效果较低剂量而言,差异显著(P0.05)。4.与模型组比较四时常服方各组P35蛋白表达较模型组均有不同程度降低,低剂量组P35阳性表达细胞低于对照组(P0.05),中剂量组与高剂量组P35阳性表达细胞显著低于对照组(P0.05),治疗组P35阳性表达细胞与对照组差异无统计学意义(P0.05)。模型组大鼠脑组织中CDK5蛋白的表达与对照组及假手术相比显著升高(P0.05),低、中、高剂量药物干预组CDK5蛋白的表达均较模型组明显减少(P0.05),低、中、高剂量组之间蛋白的表达差异无统计学意义(P0.05)。与对照组相比较,模型组ERK含量明显低于用药组,用药组ERK含量有不同程度的改变,具有统计学意义。结论:(1)采用四时常服方及阳性药物,能够不同程度提高大鼠的学习记忆能力。(2)高剂量四时常服方较低剂量四时常服方而言效果更佳。(3)采用四时常服方及盐酸多奈哌齐片能够改善大鼠生化指标。(4)敦煌四时常服方可以降低P35、CDK5蛋白的表达,提升ERK蛋白表达,这可能是是敦煌四时常服方改善AD模型大鼠认知障碍的一个作用机制。(5)敦煌四时常服方能够改善大鼠学习记忆功能,在治疗MCI及早期AD中,敦煌四时常服方能够起到较好作用。

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