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    雷帕霉素对CLP诱导脓毒症大鼠急性肾损伤模型的?;ぷ饔眉捌浠蒲芯?/h1>

    黎李俊  
    【摘要】:目的:观察雷帕霉素对脓毒症大鼠急性肾损伤的作用并探讨其可能作用机制。方法:健康雄性SD大鼠36只,使用随机数字分组法将大鼠随机分成假手术组(C组,仅将盲肠拖出腹腔,但不对盲肠进行结扎穿刺)、雷帕霉素组(R组,取出盲肠后不予结扎穿孔回纳腹腔,关腹后予腹腔内注射6mg/kg雷帕霉素)、脓毒症组(S组,采用盲肠结扎穿刺术制备大鼠脓毒症动物模型)和脓毒症+雷帕霉素干预组(SR组,通过使用盲肠结扎穿刺术给大鼠制备脓毒症模型后腹腔内注射6mg/kg雷帕霉素)。造模后24h取腔静脉血离心后上层血清检测肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)和血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)水平;ELISA法检测肾脏组织肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;采取HE染色法观察肾脏组织病理形态学改变并进行肾组织损伤病理评分;采用Western blot的方法检测肾组织LC3B、P62蛋白水平及m TOR、4EBP1、P70S6K磷酸化蛋白的表达水平。结果:1、HE染色可见假手术组和雷帕霉素组肾小球结构正常,肾小管管腔完整,肾间质未见明显炎性细胞浸润;脓毒症组肾小球毛细血管扩张、充血,肾小管上皮细胞水肿,出现空泡变性,肾皮质及间质见大量炎性细胞浸润;脓毒症+雷帕霉素干预组肾小球、肾小管和肾间质病理学改变较脓毒症组轻。2、假手术组与雷帕霉素组肾组织病理损伤评分基本一致;与假手术组相比较,脓毒症组肾组织损伤评分明显增高(P0.05);与脓毒组相比较,脓毒症+雷帕霉素干预组肾组织损伤评分显著下降(P0.05)。3、假手术组和雷帕霉素组CREA、BUN及Cys-C水平差异无统计学意义(P0.05);脓毒症组CREA、BUN及Cys-C明显高于假手术组和雷帕霉素组(P0.05);脓毒症+雷帕霉素干预组CREA、BUN及Cys-C水平显著低于脓毒症组(P0.05)。4、假手术组与雷帕霉素组TNF-α及IL-1β水平差异无统计学意义(P0.05);脓毒症组TNF-α及IL-1β明显高于假手术组和雷帕霉素组(P0.05);与脓毒症组相比,脓毒症+雷帕霉素干预组TNF-α及IL-1β水平降低(P0.05)。5、与假手术组相比,脓毒症组LC3B蛋白水升高,p62蛋白表达量降低;雷帕霉素组LC3B蛋白表达高于假手术组,而p62蛋白表达低于假手术组;与脓毒症组相比,脓毒症+雷帕霉素干预组LC3B蛋白水平显著升高,p62蛋白表达下调(P0.05)。6、与假手术组相比,其余三组m TOR、4EBP1及P70S6K磷酸化蛋白水平下降(P0.05)。雷帕霉素组较假手术组m TOR、4EBP1及P70S6K磷酸化蛋白表达水平降低(P0.05)。与脓毒症组相比,脓毒症+雷帕霉素干预组的m TOR、4EBP1及P70S6K磷酸化蛋白表达量下调(P0.05);结论:脓毒症大鼠腹腔注射雷帕霉素可以降低肾损伤程度和减轻肾脏组织病理改变,分析其原因可能与雷帕霉素通过抑制m TOR信号通路从而促进肾脏组织自噬有关。


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