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    缝隙连接蛋白43在不同浓度七氟醚对大鼠离体心脏低温全心缺血再灌注心律失常影响中的作用

    王贵龙  
    【摘要】:目的:观察不同浓度七氟醚对大鼠离体心脏低温全心缺血再灌注心律失常的影响,并探讨心室肌电生理及缝隙连接蛋白43(Cx43)在其中的作用。方法:健康成年雄性SD大鼠40只,体重300±20 g,成功制备langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注15 min后,随机分为5组,每组8只:C组(正常对照组)、IR组(低温全心缺血再灌注组)、Sev0.5组(0.5 MAC七氟醚处理组)、Sev1.0组(1.0 MAC七氟醚处理组)、Sev2.0组(2.0 MAC七氟醚处理组)。C组:继续灌注37℃K-H液105 min;IR组:继续灌注37℃K-H液15 min后,注射Thomas液(4℃,20 ml/kg)使心脏停博60 min,心脏周围用4℃K-H液?;?停搏30 min时半量复灌Thomas液(4℃,10ml/kg),60 min时使用37℃K-H液再灌注30 min;Sev0.5组:继续灌注含饱和0.5MAC七氟醚的37℃K-H液15min后,注射Thomas液(4℃,20 ml/kg)使心脏停博60 min,心脏周围用4℃K-H液?;?停搏30 min时半量复灌Thomas液(4℃,10 ml/kg),60 min时使用含饱和0.5MAC七氟醚的37℃K-H液再灌注30 min;Sev1.0组:Sev1.0组除七氟醚浓度与Sev0.5组有区别,其余均相同;Sev2.0组:Sev2.0组除七氟醚浓度与Sev0.5组有区别,其余均相同。于再灌注即刻至灌注结束,记录心脏复跳时间、心律失常类型及心律失常持续时间;于灌注末采用程控电刺激技术测量并记录有效不应期(effective refractory period,ERP)、传导速度(conduction velocity,CV)、室颤阈(ventricular fibrillation threshold,VFT);采用Western-Blot和免疫组织化学染色观察Cx43的表达和分布。结果:(1)再灌注心律失常:除C组外,再灌注期间其余各组均有不同程度的室性早搏、室性心动过速及室颤发生;其中IR组有6例发生心律失常,Sev0.5组有1例发生心律失常,Sev1.0组有2例发生心律失常,Sev2.0组1例发生心律失常;与IR组比较,Sev0.5组、Sev1.0组、Sev2.0组心脏复跳时间及心律失常持续时间缩短,心律失常发生率均降低(P0.05);Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组的心脏复跳时间、心律失常持续时间及心律失常发生率差异无统计学意义(P0.05)。(2)ERP、CV、VFT:与C组比较,IR组、Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组ERP、VFT增大(P0.05),与IR组比较,Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组ERP、VFT减小(P0.05);与C组比较,IR组、Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组CV均减慢(P0.05),与IR组比较,Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组CV增快(P0.05);Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组的ERP、CV、VFT差异无统计学意义(P0.05)(3)Cx43:与C组比较,IR组心室肌组织Cx43于闰盘处的表达明显减少,且在侧侧的分布相对增加(P0.05);与IR组比较,Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组上述Cx43改变有所缓解,表达量均明显增加(P0.05);Sev0.5组、Sev1.0组及Sev2.0组的Cx43表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:(1)低温全心缺血再灌注引起心室肌Cx43表达下调和分布紊乱,导致传导减慢、有效不应期及室颤阈增大,从而诱发RA;(2)不同浓度七氟醚可改善低温全心缺血再灌注心肌电生理的改变,降低再灌注心律失常的发生风险,其机制可能与七氟醚改善Cx43的表达和分布有关,且这一作用在0.5-2.0MAC七氟醚范围内无浓度依赖性。


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