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磁刺激引起神经元突触生长及迁移的机制研究

【摘要】:背景及目的:近年来许多的动物实验发现重复经颅磁刺激(Repetitive Transcranial Magnetic Stimulation,rTMS)治疗缺血性脑损伤,能促进受损神经细胞轴突再生、改善神经轴突重塑的作用、促进内源性神经细胞迁移并最终改善神经损伤后的功能恢复,但具体机制尚不明确。本实验目的1:体外培养原代神经元细胞,建立神经细胞缺氧缺糖(Oxygen/Glucose Deprivation)模型,体外模拟脑缺血缺氧,应用MTT方法检测磁刺激对缺血缺氧神经细胞存活率的影响,应用LDH(乳酸脱氢酶)的释放量检测磁刺激对缺血神经细胞有无损伤,免疫细胞化学方法及RT-PCR方法检测磁刺激缺血神经元后Robo2和RhoA的表达变化,离体研究磁刺激对大鼠缺血缺氧神经元的轴突再生、细胞活性和RhoA信号通路活动的影响,探讨其可能机制。2:体外培养原代神经元细胞,transwell小室体外模拟内源性神经元细胞的迁移,观察磁刺激对神经元细胞迁移的影响。 方法(第一部分): 1.选取无菌分离15-18天胎龄SD胎鼠,原代培养大鼠皮质神经元细胞。 2.取体外培养第6天SD胎鼠皮质神经元细胞免疫细胞化学方法鉴定。 3.原代皮质神经元接种培养板中,分组:(1)正常组(control,C);(2)缺氧缺糖(Oxygen/Glucose Deprivation,OGD)组;(3)假刺激(shame,S)+缺氧缺糖组;(4)40%最大刺激强度(40% of maximum intensity of stimulation,M1)+缺氧缺糖组;(5)60%最大刺激强度(60% of maximum intensity ofstimulation,M2)+缺氧缺糖组。 4.于第6d MTT检测细胞存活率,LDH释放量检测细胞损伤程度,免疫细胞化方法检测各组细胞Robo2、RhoA的阳性表达,应用RT-PCR检测各组Robo2、RhoA表达量的变化。 5.细胞接种后第2d开始磁刺激,每天于固定时间刺激,3串/d,100次/串,每串间隔时间1min,连续刺激5d,频率1HZ。 方法(第二部分): 1.选取无菌分离15-18天胎龄SD胎鼠,原代培养大鼠皮质神经元细胞。 2.取体外培养第6天SD胎鼠皮质神经元细胞免疫细胞化学方法鉴定。 3.原代皮质神经元接种于transwell小室,分组:正常组、假刺激组、40%最大刺激强度组、60%最大刺激强度组;于第6d结晶紫染色迁移出的细胞。 4.细胞接种后第2d开始磁刺激,每天于固定时间刺激,3串/d,100次/串,每串间隔时间1min,连续刺激5d,频率1HZ。 结果(第一部分): 1.皮质神经元细胞离体培养6天,神经细胞清晰可见,细胞贴壁良好,胞体较大,呈圆形、多极形,胞体折光性强,神经突起相互联络成网。用NeuN(神经元特异核蛋白)免疫细胞化学染色作分类计数,阳性神经细胞约占(93.7土5.5)%。 2.镜下观察缺氧缺糖组细胞:OGD 30 min内,神经细胞形态较正常组无明显变化;OGD 60min时,部分细胞皱缩、胞膜崩解、折光性差,LDH的释放量明显增加(P0.05)。 3.缺氧缺糖再灌注损伤后,OGD模型组的神经细胞存活率较对照组显著降低(P0.05),而Robo2、RhoA的表达及细胞LDH释放量较对照组显著升高(P0.05)。假刺激组的细胞存活率、LDH释放量、Robo2及RhoA的表达较OGD/R模型组无明显变化(P0.05),40%最大强度刺激组、60%最大强度刺激组的细胞存活率、Robo2的表达较OGD/R模型组明显增加(P0.05),40%最大强度刺激组、60%最大强度刺激组的LDH释放量、RhoA的表达较OGD组明显下降(P0.05)。 结果(第二部分): 结晶紫染色transwell小室迁移出的细胞,结果显示:胞体、胞核均呈紫色,正常组、假刺激组迁移出的细胞数量无明显差别(P0.05),40%最大强度刺激组、60%最大强度刺激组较正常组及假刺激组迁移出的细胞数量明显增加(P0.05)。 结论: (l)磁刺激能提高缺氧缺糖神经元的存活率,降低缺氧缺糖神经元LDH的释放,对缺氧缺糖神经元有直接的神经保护作用。(2)高强低频磁刺激通过促进Robo2表达的上调,而促进受损神经元轴突再生。(3)高强低频磁刺激能抑制受损神经元RhoA的表达,可能是磁刺激促进轴突再生的机制之一。(4)高强低频磁刺激能促进体外神经细胞迁移。

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8 中石 编译;[N];大众科技报;2003年
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