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饲粮中添加磷脂对幼草鱼生长和肠道免疫功能的影响及作用机制研究

【摘要】:本试验研究了磷脂与幼草鱼生长性能、消化吸收能力、肠道免疫力和物理屏障功能的关系。试验选择初始体重为9.34±0.03 g的健康草鱼1080尾(P0.05),随机分成6个处理组,每个处理组设3个重复,每个重复60尾鱼。6个处理组分别饲喂磷脂水平为0.40%、1.43%、2.38%、3.29%、4.37%和5.42%的半纯合饲粮。试验结果表明,适宜水平磷脂可以显著提高幼草鱼的摄食量(FI)、饲料效率(FE)、增重百分比(PWG)以及蛋白质、脂肪和钙沉积率(P0.05)。研究发现,适宜水平磷脂能显著提高幼草鱼肝胰脏和肠道消化酶(糜蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶)活力以及前、中、后肠刷状缘酶(γ-谷氨酰转移酶、肌酸激酶、Na+/K+-ATP酶和碱性磷酸酶)活力(P0.05)。同时,适宜水平磷脂能显著提高幼草鱼肝胰脏胰蛋白酶原2、糜蛋白酶原和淀粉酶,前、中、后肠Na+/K+-ATP酶伐亚基亚型1(atpla1a.1)、Na+/K+-ATP酶α亚基亚型8(atp1a1a.4)和肌酸激酶,以及肝胰脏和各肠段中信号分子雷帕霉素靶蛋白(TOR)、核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)、eIF4E-绑定蛋白(4E-BP)和酪蛋白激酶2(CK2)基因的mRNA相对表达量(P0.05)。此外,结果表明,适宜水平磷脂能显著提高幼草鱼前中后肠溶菌酶(LZ)、酸性磷酸酶(ACP)活力和补体C3含量,上调白介素10(IL-10)、转化生长因子p1(TGF-p1)和NF-kB抑制因子α (IkBα)基因mRNA表达水平,下调白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α核因子κB p65 (NF-κB p65) IκB激酶β (IKKβ)和IκB激酶γ (IKKγ)基因mRNA表达水平(P0.05)。研究还发现,适宜水平磷脂能显著降低幼草鱼肠道丙二醛(MDA)、蛋白羰基(PC)和活性氧(ROS)含量,提高抗超氧阴离子(ASA)抗羟自由基(AHR)、铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)活力和还原型谷胱甘肽(GSH)含量(P0.05)。进一步研究发现,适宜水平磷脂能显著提高幼草鱼前中后肠闭锁小带蛋白(ZO-1)、occludin、claudin3、claudinb、claudin c、claudin 12基因mRNA表达水平,肠道SOD1、GPx、GR、核因子E2相关因子2(Nrf2)基因mRNA表达水平,下调肠道Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白la (Keap1a)基因mRNA表达水平(P0.05)。综上所述,饲粮中添加磷脂能提高幼草鱼生长性能、消化吸收能力、肠道免疫力和物理屏障功能。以PWG、胰蛋白酶活力、AKP活力为标识,用二次回归分析确定出幼草鱼饲粮中磷脂最适水平分别为3.46%、3.56%、3.18%。

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