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当归芍药散治疗AD的入血生物活性成分及复方对其生物利用度的影响

【摘要】:目的:本课题研究经典名方当归芍药散血中转移成分,探讨复方对其生物活性成分生物利用度的影响。为探明当归芍药散治疗老年痴呆的药效物质基础和配伍机理打下基础。方法:运用液质联用技术建立检测当归芍药散水提物中主成分有效化合物的定性、定量方法,运用多维液质技术对有效成分在大鼠血浆中进行鉴定分析,考察有效主成分在大鼠中的入血情况。分别建立检测大鼠血浆中丁烯基苯酞、泽泻醇B含量的HPLC-MS/MS定量分析方法,分别对方法学的专属性、线性、准确度、精密度和稳定性等方面进行验证,并应用到测定血浆样品中当归芍药散提取物中丁烯基苯酞、泽泻醇B的含量。SD大鼠灌胃给予当归芍药散提取物10mg/kg、丁烯基苯酞15mg/kg和泽泻醇B 15mg/kg后于不同时间点连续取血,测定血药浓度。采用DAS 2.0软件计算药动学参数,并对各组药动参数进行比较。结果:HPLC-MS/MS法检测到当归芍药散的主要成分有40个,大鼠灌胃给予当归芍药散提取物后血清中检测到22个化学物,UPLC-MS/MS法检测到当归芍药散的主要成分有34个,大鼠灌胃给予当归芍药散提取物后血清中检测到25个化学物,并对当归芍药散中丁烯基苯酞、泽泻醇B进行了定量测定。结果显示:川芎内酯A、丁烯基苯酞、藁本内酯、泽泻醇B、白芍苷、芍药苷、白术内酯III、白术内酯II、茯苓酸、儿茶素很可能为当归芍药散主要的入血成分。本实验建立了满足大鼠血浆中丁烯基苯酞、泽泻醇B的HPLC-MS/MS含量测定的方法。分别对复方组、丁烯基苯酞对照组、泽泻醇B对照组的血药浓度进行测定并进行数据统计分析,结果显示复方组中丁烯基苯酞、泽泻醇B的Cmax和AUC显著高于对照组。结论:结果显示川芎内酯A、丁烯基苯酞、藁本内酯、泽泻醇B、白芍苷、芍药苷、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、茯苓酸、儿茶素很可能为当归芍药散主要的入血成分。血浆样品中丁烯基苯酞、泽泻醇B含量的HPLC-MS/MS分析方法符合体内含量测定方法学要求。当归芍药散的丁烯基苯酞、泽泻醇B的Cmax和AUC显著高于单体丁烯基苯酞、泽泻醇B。

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