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磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究

【摘要】: 第一部分不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究 实验一:不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响 [摘要]目的研究不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的量效关系。方法24只Sprague-Dawley大鼠按刺激强度被随机分为对照组(刺激强度:0Tesla)、0.76T组(刺激强度0.76Tesla)、1.52T组(刺激强度:1.52Tesla)、1.9T组(刺激强度:1.9Tesla),4组的刺激频率为1Hz,刺激量为30脉冲,均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、Brdu和MAP-2的免疫组化表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着磁刺激强度的增加,在14天时空洞的体积逐渐缩小,组间差异具有显著性差异(P<0.05)。在空洞缩小的区域中,可以观察到GFAP的阳性表达,而无Brdu、MAP-2的阳性表达。随着磁刺激强度的增加,GFAP的阳性表达显著增强(P0.05)。Western-Blot显示:随着磁刺激强度的增加,GFAP的光密度值相应增加,而MAP-2的光密度值没有明显变化,与组化的变化趋势一致。结论刺激频率为1Hz,刺激强度不大于1.9Tesla的条件下,磁刺激可促进星形胶质细胞的迁移,随着刺激强度的增强,星形胶质细胞迁移的能力亦增强。 实验二:不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的机制研究 [摘要]目的研究不同剂量ERK抑制剂U0126对1Hz磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用的影响,以探讨不同强度磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用和ERK信号通路的关系,并选择U0126合适的阻滞剂量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126剂量被随机分为对照组(Omg/kg U0126, n=6)、低剂量组(0.1mg/kgU0126,n=6)、中剂量组(0.2mg/kg U0126, n= 6)、高剂量组(0.4mg/kg U0126,n=6),4组的刺激参数都为频率1Hz,强度1.52Tesla,刺激量为30脉冲;均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、ERK1/2和MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、ERK1/2和MAP-2的免疫组化表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着U0126剂量的增加,在14天时空洞的体积逐渐增大,GFAP和ERK1/2的阳性表达逐渐减弱,与对照组相比具有显著性差异(P0.05);并且,GFAP和ERK1/2的阳性表达呈相同的趋势;U0126中剂量组和高剂量组作用则无明显差异(P0.05);而病灶区域MAP-2呈阴性表达。Western-Blot显示:随着U0126剂量的增加,ERK1/2逐渐被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1/2的表达,随着ERK逐渐被抑制,GFAP的表达亦逐渐减弱。结论不同剂量的U0126可抑制1Hz磁刺激引起的星形胶质细胞的迁移,0.2mg/kg是较合适的剂量;1.52Tesla,1Hz磁刺激引起的星形胶质细胞迁移与ERK信号通路有关。 第二部分不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究 实验一:不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响 [摘要]目的研究不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的量效关系。方法30只Sprague-Dawley大鼠按刺激频率被随机分为对照组(刺激频率:0Hz,强度:1.52Tesla)、1Hz组(刺激频率:1Hz,强度:1.52Tesla)、5Hz组(刺激频率:5Hz,强度:1.52Tesla)、10Hz组(刺激频率:10Hz,强度:1.52Tesla)和20Hz组(刺激频率:20Hz,强度:1.52Tesla),5组的刺激量均为30个脉冲,采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、Brdu和MAP-2的表达及脊髓损伤区空洞体积的变化。结果随着磁刺激频率的增加,在第14天时空洞的体积逐渐缩小,组间差异具有显著性差异(P0.05)。在空洞缩小的区域中,可以观察到GFAP的阳性表达,而无Brdu和MAP-2的阳性表达。随着磁刺激频率的增加,GFAP的阳性表达亦显著增强(P<0.05)。Western-Blot显示:随着磁刺激频率的增加,GFAP的光密度值相应增加,而MAP-2的光密度值没有明显变化,与组化变化趋势一致。结论刺激强度为1.52 Tesla,刺激频率不大于20Hz的条件下,磁刺激可促进星形胶质细胞的迁移,并随着刺激频率的提高,星形胶质细胞迁移的能力亦增强。 实验二:不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的机制研究 [摘要]目的研究不同频率磁刺激促进星形胶质细胞迁移过程中ERK1/2所起的作用,以探讨不同频率磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用的机制,并选择U0126合适的阻滞剂量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126剂量被随机分为对照组(0mg/kg U0126, n= 6)、低剂量组(0.1mg/kg U0126, n=6)、中剂量组(0.2mg/kg U0126, n=6)、高剂量组(0.4mg/kg U0126, n=6),4组的磁刺激参数均为频率10Hz、强度1.52 Tesla,刺激量30脉冲,均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测3FAP、ERK1/2和MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、ERK1/2和MAP-2的表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着U0126剂量的增加,在第14天时空洞的体积逐渐增大,GFAP和ERK1/2的阳性表达逐渐减弱,与对照组相比具有显著性差异(P0.05),U0126中剂量组和高剂量组的作用相似无明显差异(P0.05)。而病灶区域MAP-2呈阴性表达。Western-Blot显示:随着U0126剂量的增加,ERK1/2逐渐被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1/2的表达,随着ERK逐渐被抑制,GFAP的表达亦逐渐减弱。结论不同剂量的U0126可抑制10Hz磁刺激引起的星形胶质细胞的迁移,0.2mg/kg是较合适的剂量;1.52 Tesla,10Hz磁刺激引起的星形胶质细胞迁移与ERK信号通路有关;

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