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加减行健汤联合化疗治疗胃癌术后的临床观察及其成分抗肿瘤增殖机制研究

【摘要】:研究目的:以孟河医派学术思想为指导,结合导师临床经验,通过临床对照研究,观察加减行健汤联合化疗,对比单纯化疗组,治疗胃癌术后脾胃气虚证患者的临床疗效及对生活质量的影响。研究其成分薯蓣皂苷抑制肿瘤细胞增殖的机制。研究方法:本研究分临床观察和实验研究两部分。临床观察部分:选择60例胃癌术后脾胃气虚证患者,随机分为对照组-单纯化疗组及治疗组-中药联合化疗组,观察周期3个月,观察两组治疗前后的中医症状、生活质量、肿瘤指标、淋巴细胞亚群变化,以及化疗后毒副反应,并统计分析结果。实验研究部分:首先,运用实时定量荧光PCR法检测胃癌组织中长链非编码RNAH19、HOTAIR、MALAT1的表达,选择表达量最高的HOTAIR,对比临床资料,说明HOTAIR的表达与临床病理因素之间的相关性。其次,用实时定量荧光PCR法检测胃癌细胞SGC-7901、HGC-27、MGC-803细胞株及正常黏膜上皮GES-1细胞株中三种长链非编码RNA的表达情况。选择MGC-803细胞及1ncRNAHOTAIR行下一步实验。用si-RNA下调HOTAIR的表达后,MTT法检测胃癌MGC-803细胞增殖情况,说明HOTAIR对于胃癌细胞的作用。第三步,研究薯蓣皂苷抗胃癌增殖机制。运用MTT法检测薯蓣皂苷对于胃癌MGC-803细胞的抑制作用。用si-HOTAIR、薯蓣皂苷同时干预胃癌MGC-803细胞,对比阴性对照组,用实时定量PCR法检测胃癌细胞中的HOTAIR相对表达量,MTT法、细胞克隆形成实验观察胃癌细胞增殖情况,研究薯蓣皂苷的抗胃癌增殖机制。研究结果:临床观察部分:有效评价患者共57例,治疗组29例,对照组28例。经过治疗,治疗组在中医症状改善方面优于对照组,尤其是在食少纳呆、体倦乏力、食后腹胀、大便异常、神疲懒言、面色萎黄、排便无力方面,经过治疗,治疗组优于对照组,两组治疗后比较有统计学差异(P0.05)。生活质量评价方面,EORTC QLQ-ST052量表评分方面,治疗组治疗后在躯体功能、角色功能、情绪功能、总健康、疲倦、失眠、食欲丧失、便秘、腹泻、吞咽困难、返流、进食受限等方面较对照组治疗后改善,两组治疗后比较有统计学差异(P0.05)。FACT-G评分量表,治疗组经过治疗,在生理状况及功能状况改善方面优于对照组,有统计学差异(P0.05)。经过治疗,治疗组在淋巴细胞亚群改善方面优于对照组,两组治疗后比较有统计学差异(P0.05)。两组在肿瘤指标变化方面无统计学差异(P0.05)。PFS方面,随访日期为2016年10月30日,中药联合化疗组中位进展时间8.0±0.21个月,化疗组中位进展时间为7.0±0.65个月,两组PFS时间无统计学差异(P0.05)。毒副反应方面,治疗前后两组在骨髓抑制、胃肠道反应、肝功能异常、神经毒性、皮肤反应方面无统计学差异(P0.05)。实验部分:在胃癌组织中长链非编码RNAHOTAIR、H19、MALAT-1均高表达。其中,HOTAIR表达与胃癌的分期、淋巴结转移、浸润深度相关。胃癌MGC-803、SGC-7901、HGC-27细胞株中,HOTAIR、MALAT-1也高表达。选择胃癌MGC-803细胞和HOTAIR进行后续实验。用si-RNA下调胃癌MGC-803细胞中的HOTAIR表达后,胃癌细胞增殖受到抑制。可以认为HOTAIR高表达可促进胃癌MGC-803细胞增殖。薯蓣皂苷为加减行健汤的抗肿瘤成分之一。用薯蓣皂苷干扰胃癌MGC-803细胞后,胃癌MGC-803细胞中的HOTAIR表达量下降,胃癌细胞增殖也受到抑制。认为通过下调胃癌细胞中HOTAIR的表达从而抑制胃癌细胞增殖是薯蓣皂苷抗肿瘤的可能机制。结论:加减行健汤配合化疗能起到提高生活质量,改善症状,提高机体免疫功能的作用。实验研究证实,其抗肿瘤成分薯蓣皂苷可能通过下调胃癌细胞中HOTAIR的表达从而抑制胃癌细胞增殖。

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