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神经血管单元在复合型AD模型大鼠中变化的研究

【摘要】:目的:建立复合型阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠模型,研究AD模型大鼠神经血管单元(neurovascular unit,NVU)中GFAP、NeuN和CD31及NOS1的表达的变化,旨在探讨神经血管单元与AD的可能关系,为AD的发病机制、临床防治等提供理论依据。 方法: (1)复合型AD大鼠模型的建立实验分组:假手术组,模型组。腹腔注射D-半乳糖联合侧脑室注射Aβ1-42建立复合型AD模型;假手术组采用生理盐水做安慰剂; (2)行为学检测采用Morris水迷宫检测大鼠学习和记忆能力; (3)抗氧化指标检测检测血清中SOD、MDA、NO、NOS及GSH/GSSG的比值; (4)形态学的观察TUNEL凋亡原位检测试剂盒检测凋亡,免疫荧光染色和免疫印迹检测脑组织中Trx的表达; (5)免疫荧光染色法检测大鼠脑组织海马区域中神经血管单元中的星形胶质细胞特异性标记物GFAP、神经元特异性标记物NeuN、内皮细胞特异性标记物CD31及NOS1的表达。 结果: (1) Morris水迷宫检测显示:与假手术组相比,模型组大鼠学习潜伏期明显较长,模型组大鼠的学习和记忆能力明显下降,有显著统计学差异(P0.01); (2)抗氧化指标检测:与假手术组相比,模型组大鼠血清中NO水平和NOS活性显著升高,SOD活力显著下降(P 0.01),MDA含量显著升高(P 0.01),GSH/GSSH显著下降(P 0.01),统计学有显著性差异; (3)形态学观察:TUNEL凋亡原位检测试剂盒检测,与假手术组相比,模型大鼠脑组织中神经元凋亡发生。免疫荧光染色和免疫印迹检测显示,Trx在模型组大鼠脑中的表达降低; (4)免疫荧光染色法检测显示:与假手术组相比,在模型组大鼠脑海马区域中星形胶质细胞标记物GFAP的表达增加,内皮细胞特异性标记物CD31的表达增加,而神经元细胞标记物NeuN的表达降低。NOS1在模型组大鼠脑组织的神经元中的表达降低。 结论: 在D-半乳糖亚急性衰老模型基础上建立Aβ_(1-42)复合型AD动物模型,此模型大鼠在行为学、抗氧化指标等方面表明AD大鼠学习记忆能力下降,清除自由基能力减弱。因此,此模型可以用于阿尔兹海默病的相关研究。 在模型组大鼠脑组织中,神经元中Trx的表达降低与神经元凋亡增多呈负相关性。因此,Trx可作为AD防治过程中的新靶点。 在复合型AD大鼠脑组织中,当Aβ增高或积聚,神经血管单元中的星形胶质细胞和血管内皮细胞发生活化和神经元凋亡或死亡,可能引起血脑屏障(blood brainbarrier,BBB)出现异常,影响NVU的稳态,因此,以神经血管单元作为研究切入点,将更加有利于神经退行性疾病的认知功能障碍等的早期防治及其病理机制的进一步研究。

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