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慢性肌筋膜触发点大鼠模型的电生理和病理组织学研究

【摘要】:研究目的: 日常生命活动或体育运动损伤后常常出现一些慢性疼痛后遗症状,这些疼痛往往会引起关节和脊柱周围疼痛,导致关节障碍。这些慢性疼痛大部分为骨骼肌疼痛,而肌筋膜疼痛触发点是导致骨骼肌疼痛的常见原因之一。临床上慢性肌筋膜疼痛综合症是以疼痛为主一组症候群,这种症候群表现为疼痛、牵涉痛、自主神经的和骨骼肌功能的障碍等症状。肌筋膜疼痛严重影响了人们的生活和工作,并成为消耗卫生资源的重要原因。目前认为受累肌内存在有骨骼肌或肌筋膜内的疼痛触发点。为了研究其发病机制,目前有关触发点的模型多为模拟模型或隐性触发点模型,无法代表活化触发点的全貌;因此无法说明触发点的自发肌电位和动作电位的真实变化,而且也无法说明到真实活化触发点的病理组织学的真实改变。本研究通过经济实惠的大鼠作为实验动物,采用股内侧肌打击结合离心运动的方法建立创伤性肌筋膜疼痛触发点的动物模型,在经历不同恢复时间后,检测触发点肌电图表现和观察触发点的病理组织学的改变,了解肌筋膜疼痛触发点的本质和发病特点,以推论触发点的可能发病机制。 研究方法: 32只七周龄雄性SD大鼠,平均体重220g-260g,随机分为ABCD四组,每组8只,A组为正常对照组,BCD三组为实验干预组。A组正常对照组在造模期与恢复期均正常喂养,不进行任何干预。实验干预组造模期每周第一天打击左下肢股内侧肌,打击后第二天配合离心运动,造模期为8周。实验干预组恢复期同对照组,不进行任何实验干预,正常喂养,其中B组恢复4周,C组恢复8周,D.组恢复12周。分别在不同时期分批对大鼠进行造模效果检查和取材,手术暴露大鼠股内侧肌,触摸打击处及周围肌肉的紧张带和收缩结节、针刺紧张带引起局部抽搐反应、记录紧张带处的自发性电位和记录结节数目。最后,对紧张带或结节处的局部组织进行组织活检取材:1.组织进行HE染色后,光镜下观察病理切片的结节数目、形态及大小等变化;2.使用透射电子显微镜超薄切片技术制作电镜标本,电镜观察触发点组织的肌丝排列、肌小节、线粒体等超微结构特点。将实验干预组和对照组所得结果进行比较分析,所用数据统计分析均采用SPSS17.0软件包进行分析。 研究结果: A组对照组股内侧肌附近发现紧张带或触发点个数平均0.13个(1/8);B、C、D组平均发现触发点个数分别为3.00个(24/8)、2.63个(21/8)、2.25个(18/8),紧张带或触发点在针刺时均出现局部抽搐反应。静息状态下,大鼠股内侧肌附测量肌肉的自发电位,A、B、C、D各组一分钟内出现自发电位的频数分别为2.75±2.87,172.57±102.88,151.63±65.37,168.14±64.53。对照组与实验组两两比较,P0.01具有高度显著性差异,实验组之间两两比较P0.05没有统计意义。A、B、C、D各组自发电位的波幅分别为26.06±16.67μV,33.08±18.40μV,93.26±163.18μV,78.27±161.68μV,其中A、B两组与C、D两组比较有显著性差异P<0.05,而A、B组之间与C、D组之间不具有显著性差异。 病理切片横切面显示,对照组肌细胞形态规则、大小均匀,未发现有大小不一、圆形、增大、深染的肌细胞,实验组横切面均发现增大、圆形深染的挛缩结节,实验组各组均出现炎细胞浸润和核内移(10%)现象。纵切面,对照组表现为排列紧密而规律的纵向肌纤维。实验组B、C、D组均出现排列紊乱、中央膨大两端变细或相间出现粗细不等的梭形肌纤维。ABCD各组肌细胞直径分别为22.84±0.48μm,44.73±9.50μm,45.77±8.70μm,47.81±5.84μm,实验组与A组对照组比较具有高度显著差异性,P0.01,而实验组之间无显著差异性。 电子显微镜观察:对照组横切显示,粗细肌丝排列规则,大量线粒体存在,线粒体形态呈卵圆形并存在折叠嵴结构;纵切显示,肌原纤维排列整齐,明暗带交替出现。实验组横切均显示,线粒体数量明显减少,呈圆形且嵴结构减少或消失;纵切显示,肌原纤维排列紊乱、模糊不清,Z线呈水纹样改变。ABCD各组肌小节长度分别为1.95±0.02μm,1.92±0.08μm,1.53±0.06μm,1.48±0.07μm,实验组C、D组与A组对照组和B组实验组比较具有高度显著差异性,P0.01,另外,C、D组之间比较无显著性差异,B组与A组比较无显著差异性,P0.05。 研究结论: 1.紧张带或触发点,局部抽搐反应、自发电位等电生理特征和病理组织学改变证明打击结合离心运动方式建立的肌筋膜疼痛触发点大鼠模型成功。延长恢复期,肌筋膜疼痛触发点仍然存在,说明大鼠模型复制的MTrPs可长期存在,符合临床肌筋膜疼痛触发点的特征。 2.恢复4周组肌筋膜疼痛触发点为早期触发点,存在明显炎症变化和肌肉损伤现象,恢复8周和恢复12周,肌筋膜疼痛触发点表现相似,为慢性触发点,说明触发点在恢复8周时已稳定存在,建立肌筋膜疼痛触发点模型时无需恢复12周即可复制稳定肌筋膜疼痛触发点。 3.肌筋膜疼痛触发点产生的自发性电位是一种高频率的异常终板电位,说明肌筋膜触发点位于运动终板附近。 4.病理组织学光镜观察受累骨骼肌触发点处聚集的圆形结节及膨大并相间出现的变细肌纤维结构,说明骨骼肌触发点存在异常收缩的收缩结节和因收缩而导致结节两端的变细,肌筋膜疼痛触发点是一种异常肌纤维改变。炎性浸润提示肌筋膜触发点存在慢性的炎症过程,核内移则提示可能存在神经肌肉接头功能异常现象。 5.电镜观察肌小节排列紊乱,Z线水纹样改变,线粒体数量减少,结构异常,提示为受累肌肌筋膜疼痛触发点处存在能量危机现象,并且超微结构显示肌筋膜疼痛触发点肌纤维维存在损伤现象;肌小节显著性缩短进一步验证肌纤维存在异常收缩现象。

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