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两种不同规格的三月龄草鱼免疫组织结构及其相关因子的比较研究

【摘要】:为研究处于同一时期但养殖条件不同的草鱼鱼体规格与发育状态间是否具有一致性,本实验观察了出膜后开始高密度、低投喂的压塘3月龄草鱼与正常养殖的普通3月龄草鱼头肾、中肾、肠道和脾脏的显微结构,并对其进行疫苗腹腔注射处理,通过实时荧光定量PCR方法检测免疫7 d后、14 d后不同规格鱼体的头肾、中肾、肠道和脾脏中IgM与MHCⅠ的相对表达量,观察了免疫前后IgM阳性细胞在四个组织当中的分布变化情况,结果显示:压塘鱼头肾处于功能多样的混合型肾脏及分泌组织阶段;中肾单位大多还处于发育中或亚成熟状态;肠道中可观察到大量粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞;脾脏已具有一定的免疫功能,但还未未分化为明显的红髓和白髓。普通鱼头肾中有大量不规则分布的淋巴细胞;此时的部分中肾细胞开始表现出与成体相似的细胞形态;肠道粘膜组织中与免疫相关的细胞在数量上也进一步增加;脾脏中可见相互间界限不明的红髓和白髓混合排列,已具有成熟的组织结构。免疫后草鱼IgM在普通鱼免疫14 d后的各组织中高表达,其中头肾(24.07倍,P0.01)、中肾(74.51倍,P0.01)、脾脏(60.31倍,P0.01)中相对表达量比肠道中高很多。并且两种草鱼各自的头肾、中肾和脾脏中的IgM相对表达量也高于其肠道。头肾中的MHCⅠ相对表达量在压塘鱼免疫14 d后最高(12.73倍,P0.01);中肾中的表达量在普通鱼免疫14 d后最高(56.02倍,P0.01);肠道中的表达量在压塘鱼免疫7 d后最高(2.16,P0.05);脾脏中的表达量在普通鱼免疫14 d后最高(12.45,P0.05)。在免疫后的14 d内,压塘鱼MHCⅠ除在头肾中的相对表达量增幅变大外,中肾、肠道和脾脏中的MHCⅠ相对表达量增幅均有所下降,而普通鱼在免疫后的14 d内,各组织中的MHCⅠ相对表达量的增幅都有升高。经草鱼出血病活疫苗(GCHV-892株)免疫前IgM阳性细胞在头肾中数量最多,脾脏和中肾中含量不一,在肠道中几乎没有或很少。免疫后各组织中IgM阳性细胞部分出现增多现象,以普通鱼免疫14 d后的中肾增幅最大。头肾和脾脏中的IgM阳性细胞数在普通鱼免疫14 d后也都有大幅度增加现象,但肠道中的IgM阳性细胞数在免疫前后的各时期中变化都不大。结果表明,处于同一时期但养殖条件不同的压塘鱼与普通鱼间各组织发育状况存在较大差异,鱼体规格与发育状况具有一致性,正常养殖的普通鱼各免疫相关组织发育相对成熟,可以进行免疫。

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