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小刺猴头发酵浸膏对草鱼免疫功能及肠道菌群的影响

【摘要】:本文研究了小刺猴头发酵浸膏[submerged fermentation concentrate of Herici um caput-medusae(Bull.:Fr.)Pers.,HFC]对草鱼血液生化指标、抗嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染能力、肠道形态结构及消化酶活力的影响。同时采用PCR-DGGE技术研究HFC对草鱼肠道菌群组成的影响。本试验共选用600条草鱼幼鱼随机分为4组,3个重复/组,50条草鱼/重复。投喂基础饲料(添加0 mg/kg)和试验饲料(400mg/kg、800mg/kg、1200mg/kg)分别记作H0组、H400组、H800组、H1200组。对草鱼进行45d的饲养试验,分别在15d、30d、45d采集血液样本,检测血清中白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)含量,酸性磷酸酶(ACP)、总超氧化歧化酶(T-SOD)、溶菌酶(LSZ)、碱性磷酸酶(AKP)的活力。并采用酶联免疫吸附剂法检测(Enzyme-Linked Immunosorbent Assays,ELISA)45d血清中免疫球蛋白IgM、细胞因子白介素2(IL-2)、白介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。在饲喂试验结束后腹腔注射A.hydrophila进行感染试验,计算感染后96h存活率。试验结果表明,饲喂30d后H1200组较H0组的ALB、TP含量显著升高(p0.05)。各浓度添加组均能提高草鱼血清中T-SOD、ACP、LSZ、AKP活力((p0.05);与对照组相比,H1200组草鱼血清中IL-2、IL-10的含量增加(p0.05);且饲喂不同浓度HFC均能提高草鱼抗嗜水气单胞菌的存活率。采集饲喂15d、30d、45d各组肠道内食糜样品,利用PCR-DGGE技术对肠道菌群进行检测,结果显示草鱼肠道菌群主要细菌具有一定的多样性,主要菌群为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia)。大部分为革兰氏阴性细菌,少数为革兰氏阳性细菌,且减少有害菌的数量。采集15d、30d、45d各组肠道及内容物,检测HFC对草鱼消化功能的影响。采用切片方法,测量肠道隐窝深度、绒毛长度并计算V/C比值,结果表明HFC能促进前、后肠绒毛生长,与H0组相比前肠V/C比值增加明显(p0.05),而对后肠V/C比值作用不显著(p0.05)。各组添加浓度HFC均能显著提高胰蛋白酶(Trypsin)活力(p0.05),对淀粉酶(Amylas)活力影响不显著(p0.05),添加浓度800mg/kg、1200mg/kg HFC对脂肪酶(Lipase)活力有一定的抑制作用。综上所述,添加800~1200mg/kg的HFC对草鱼的免疫功能、肠道菌群及消化功能均有改善作用。

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