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PD-1在非小细胞肺癌表达及预后中的应用研究

【摘要】:第一部分NSCLC患者外周血中PD-1表达水平及淋巴细胞亚群分析目的:观察不同临床分期、病理类型的非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血淋巴细胞亚群情况与程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达水平,探讨淋巴细胞亚群比率、PD-1表达水平与NSCLC临床分期的关系,探讨其临床意义。方法:收集38例肺腺癌(A组)、35例肺鳞癌(B组)患者作为实验组,以30例健康体检者(C组)作为对照组,均采集晨起外周血液,采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测外周血中CD4+、CD8+、CD19+、NK细胞比例,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测外周血清中PD-1的表达水平。结果:(1)A、B、C组外周血中PD-1表达水平分别为(104.98±20.76)、(109.13±24.65)和(50.80±14.38)pg/ml,实验组高于对照组,差异有统计学意义(F=78.581,P0.001),AB组间差异无统计学意义(P0.05);(2)实验组外周血中CD4+、NK细胞比率低于对照组,CD8+细胞比率高于对照组,差异均有统计学意义(P0.001),CD19+细胞与对照组相比差异无显著性(P0.05),AB组间差异均无统计学意义(P0.05);(3)在TNM分期上,III、IV期CD4+细胞比率显著低于I、II期(tA=7.329,tB=5.376),NK细胞比率显著低于I、II期(tA=3.772,tB=5.169),CD8+细胞比率显著高于I、II期(tA=-0.592,tB=-6.416),PD-1表达水平明显显著高于I、II期(tA=-6.151,tB=-6.601),差异均有统计学意义(P0.001)。CD19+比率差异无统计学意义(tA=-0.981,tB=-0.224,P0.05);(4)在TNM分期基础上,PD-1的表达水平与NK细胞比率呈负相关(rA=-0.568,rB=-0.631),与CD8+细胞比率呈正相关(rA=0.643,rB=0.648),差异均有统计学意义(P0.001),与CD4+、CD19+无相关性,差异无统计学意义(p0.05)。结论:nsclc患者免疫功能与正常人群相比明显降低,外周血pd-1的表达水平较健康体检者明显上凋,淋巴细胞亚群情况及pd-1表达水平存在一定相关性,且均与肺癌分期存在一定相关性,检测外周血淋巴细胞亚群情况及pd-1表达情况对nsclc患者病情监测及预后判断具有重要作用,可作为nsclc患者免疫治疗筛查的方法之一。第二部分非小细胞肺癌患者pd-1的表达与临床病理参数的关系目的:研究nsclc患者病理组织、对应外周血中cd8+t淋巴细胞表面的pd-1的表达特点,并分析两者相关性及与临床病理参数(年龄、性别、病理类型、tnm分期、组织分化程度、淋巴结转移、远处转移)的关系。方法:收集90例nsclc组织标本及对应新鲜血液,分别以45例癌旁正常肺组织标本及30例健康体检者外周血作为正常对照,采用免疫组化sp法检测病理组织中pd-1的表达情况,流式细胞术(fcm)分析pd-1在外周血中cd8+t淋巴细胞上的表达情况。结果:(1)pd-1主要表达于肿瘤间质淋巴细胞膜,在nsclc癌组织、癌旁正常肺组织的pd-1阳性率分别为75.56%(68/90)和6.67%(3/45),差异有统计学意义(χ2=57.102,p0.05);(2)nsclc组、健康对照组pd-1+cd8+t表达率分别为(16.73±3.93)%和(7.92±2.00)%,差异有统计学意义(t=11.764,p0.05);(3)pd-1阳性率和pd-1+cd8+t表达率均与tnm分期、组织分化程度、淋巴结转移、远处转移呈相关性(p0.05),与年龄、性别、病理类型无明显相关性(p0.05)。pd-1阳性率与pd-1+cd8+t表达率呈显著相关(rs=0.780,p0.001)。结论:pd-1在nsclc患者中高表达,pd-1信号通路可能抑制抗肿瘤免疫。pd-1表达与患者的tnm分期,组织分化程度、淋巴结转移有关,可作为NSCLC治疗的新靶点及判断预后的指标之一。NSCLC患者血液标本可代替病理组织进行PD-1检测,可成为筛查PD-1靶向治疗人群的指标之一。

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