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龟龄集对AD认知功能的疗效评价及突触和髓鞘相关作用研究

【摘要】:阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是痴呆最常见的类型,全球患病人数呈现迅速增长,给社会和家庭带来沉重的经济负担。但目前现代医学对AD的治疗效果并不理想。然而,中药复方具有多种活性成分,其治疗AD具有多途径、多靶点、协同增效的特点,可发挥整体调节的作用。龟龄集是补肾抗衰老复方,探索其在AD中的作用及可能的机制具有重要的应用价值。目的:评价龟龄集治疗AD的临床疗效,探讨龟龄集对SAMP8小鼠学习记忆能力和突触髓鞘相关蛋白表达的影响,为龟龄集治疗AD的临床应用提供科学依据。方法:1临床研究:采用随机、双盲、对照试验,一共纳入AD肾虚髓减型患者60例,随机分为试验组和对照组,试验组给予龟龄集胶囊治疗,对照组给予银杏叶片治疗,疗程24周。观察治疗前后患者的ADAS-cog、MMSE、ADL和中医证候积分变化情况和安全性。2实验研究:64只SPF级SAMP8小鼠随机分为模型组(Model)、龟龄集低剂量组(GLJ-L)、龟龄集高剂量组(GLJ-H)和银杏叶组(YXY),以SAMR1为正常对照(Control),每组16只。GLJ-L、GLJ-H、YXY组分别给予龟龄集低剂量、龟龄集高剂量和银杏叶片,模型与对照组给予等体积蒸馏水,灌胃12周。通过新物体识别和Morris水迷宫实验,观察药物干预对SAMP8小鼠认知能力的影响;HE染色和尼氏染色观察脑组织病理形态和尼氏小体数量变化;Western blot和荧光定量PCR分别检测海马组织GAP43、SYP、MBP、BDNF、TrkB 蛋白和 mRNA 表达水平。结果:1临床研究结果:(1)神经心理测评量表评分变化:与治疗前比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组ADAS-cog评分均明显下降(P0.01或P0.05),组间比较,治疗12周和治疗24周,两组ADAS-cog评分无统计学差异(P0.05)。与治疗前比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组MMSE评分均明显上升(P0.01),组间比较,治疗12周和治疗24周两组MMSE评分无统计学差异(P0.05)。(2)日常生活能力得分变化:与治疗前比,试验组和对照组ADL量表积分未见明显变化(P0.05)。(3)中医证候积分变化,与治疗前比,治疗24周后试验组和对照组积分明显下降(P0.01),试验组中腰膝酸软、倦怠思卧有效率明显高于对照组(P0.01)。试验组中医证候总有效率为59.26%,对照组总有效率为19.05%,差异有统计学意义(P0.01)。(4)安全性评价:两组患者在治疗期间未出现严重不良反应,治疗期间两组患者血、尿常规、肝(ALT、AST)肾(UREA、CRE)功能、心电图未见明显异常变化。2实验研究结果:(1)龟龄集对SAMP8小鼠识别记忆能力的影响与对照组比,模型组SAMP8小鼠辨别指数有下降趋势,差异无统计学意义(P0.05);与模型组比,GLJ-L、GLJ-H和YXY组SAMP8小鼠辨别指数有升高趋势,无统计学意义(P0.05)。(2)龟龄集对SAMP8小鼠空间学习记忆力的影响定位航行训练结果显示:各组小鼠潜伏期随训练天数逐渐缩短。与对照组比,模型组逃避潜伏期明显延长(P0.01)。与模型组比,GLJ-L、GLJ-H组和YXY组潜伏期明显缩短(P0.01)。组内比较,与第一天潜伏期比较,对照组、GLJ-L、GLJ-H组第3天表现出明显的学习能力,潜伏期短于第一天(P0.05,P0.05,P0.01),但GLJ-L、GLJ-H组潜伏期长于对照组;YXY组小鼠学习能力改善出现在第2天(P0.05),潜伏期长于对照组。同一天内,与对照组比,模型组潜伏期均较长(P0.05,P0.01)。与模型组比,GLJ-H和YXY组潜伏期第2-5明显缩短(P0.01),GLJ-L组潜伏期第5天明显缩短(P0.05)。空间探索结果显示:与对照组比,模型组穿台次数、在目标象限停留时间比和目标象限游泳路程比均明显减少(P0.01,P0.01,P0.05)。与模型组比,GLJ-L和GLJ-H组穿台次数增加有统计学意义(P0.05);GLJ-L、GLJ-H和YXY组目标象限游泳时间比增加有统计学意义(P0.05);GLJ-H组目标象限游泳路程比增加有统计学意义(P0.01)。(3)龟龄集对SAMP8小鼠海马病理形态的影响对照组小鼠海马CA1区细胞排列紧密、整齐有序,形态规则,轮廓清晰,层次明显,核仁清晰,尼氏小体数量较多。模型组海马CA1区细胞数量减少、排列无序,轮廓不清,核固缩或消失,尼氏小体数量明显减少。与模型组相比,YXY、GLJ-L、GLJ-H组小鼠海马CA1区病理形态得到改善,细胞排列有层次而紧密,细胞数量和层数增加,尼氏小体数量较多。(4)龟龄集对SAMP8小鼠突触、髓鞘相关蛋白的表达的影响与对照组比,模型组GAP43、MBP的蛋白和mRNA表达水平下降(P0.01),SYP mRNA表达水平明显下降(P0.01)。GLJ-L、GLJ-H组GAP43、MBP的蛋白和mRNA表达显著增加(P0.05或P0.01)、SYP mRNA表达水平也明显升高(P0.01)。(5)龟龄集对BDNF/TrkB信号通路的影响与对照组比,模型组BDNF蛋白和mRNA表达水平显著降低(P0.01)。TrkB蛋白表达量降低无统计学意义(P0.05)。与模型组比,GLJ-H组BDNF、TrkB蛋白表达水平显著升高(P0.01,P0.05),mRNA表达量也显著升高(P0.01)。结论:1临床研究结论:龟龄集可以降低轻中度AD患者的ADAS-cog评分和中医证候积分,增加MMSE评分,改善认知功能,治疗期间无严重不良反应。2实验研究结论:龟龄集改善SAMP8小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与增加海马CA1区神经元数量,调节BDNF/TrkB信号通路,促进突触、髓鞘相关蛋白表达有关。

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14 Robin Seaton Jefferson 编译 廖联明;[N];医药经济报;2018年
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16 树熊 编译;[N];医药经济报;2019年
17 本报记者 孙宏阳;[N];北京日报;2017年
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