bck

收藏本站

棉花盐胁迫应答基因克隆与功能验证

【摘要】:棉花是盐碱地先锋作物。研究耐盐机理、提高棉花耐盐性具有重要理论与实践意义。基于实验室前期研究工作,从盐胁迫下陆地棉根系抑制性杂交差减文库筛选得到5个候选基因GhSnRK2.6, GhCIPK6, GhCPK5、GhC2H2和GhWRKY41。通过克隆全长基因,构建植物表达载体,分别转化野生型拟南芥及棉花,分析其功能;通过构建瞬时表达载体,进行亚细胞定位;通过调查转基因材料耐盐相关性状,分析这5个盐胁迫应答基因的功能;筛选耐盐品系,为棉花耐盐育种提供材料来源。(1)克隆了盐胁迫应答基因GhSnRK2.6, GenBank登录号为JN872373, ORF全长1,086bp,编码361个氨基酸。该基因包含9个外显子,8个内含子。构建瞬时表达载体p35S-GhSnRK2.6:GFP,基因枪法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达分析,该蛋白定位于细胞核。构建植物表达载体p2301M-GhSnRK2.6,分别转化野生型拟南芥和棉花,分析转基因材料耐盐性。结果GhSnRK2.6过表达拟南芥苗期及成熟期的耐盐性提高;转基因棉花后代材料盐胁迫下发芽率显著高于受体株系,耐盐性提高;另外,盐胁迫下转基因棉花的产量性状和纤维品质也优于受体对照。(2)构建瞬时表达载体p35S-GhCIPK6:GFP,基因枪轰击法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达分析,证明GhCIPK6定位于细胞质。BiFC分析确定GhCIPK6与GhCBLl和GhCBL8均存在互作关系,GhCBLl-GhCIPK6复合体定位于细胞核,GhCBL8-GhCIPK6定位于细胞核及细胞膜。将植物表达载体pBI-GhCIPK6转化棉花,分析耐盐性。证明盐胁迫下,GhCIPK6通过参与不同调控路径,调控细胞K+平衡,维持细胞膜稳定性,降低盐胁迫对质膜的伤害,保证植株正常生长,提高转基因棉花后代的耐盐性。(3)构建瞬时表达载体进行亚细胞定位,结果转录因子GhC2H2定位于细胞核。将前期构建的植物表达载体pBI-GhC2H2转化棉花,分析其耐盐性。结果证明过表达GhC2H2可提高转基因株系的衣分和单铃重,促进纤维增长,保证转基因棉花产量,提高转基因棉花后代的耐盐性。(4)构建瞬时表达载体进行亚细胞定位,结果GhCPK5定位于细胞核。将前期构建的植物表达载体pBI-GhCPK5转化棉花,分析相关性状,结果在盐胁迫下,GhCPK5转基因株系的单铃重和衣分高于受体,纤维长度增长,马克隆值下降,断裂比强度提高,纤维品质优于受体对照。(5)构建瞬时表达载体进行亚细胞定位,结果转录因子GhWRKY41定位于细胞核。将前期构建的植物表达载体p2301M-GhWRKY41转化棉花并分析耐盐性。结果表明,过表达GhWRKY41可提高转基因棉花胁迫下发芽率,盐胁迫下转基因株系的铃重和衣分变化不大,但对纤维品质存在不利影响。

下载App查看全文

(如何获取全文? 欢迎:、、)

支持CAJ、PDF文件格式


 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978


{bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育下载}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck体育下载}| {bckbet}| {bcksports}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bck官网}| {bck体育下载}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育app}| {bck体育}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育下载}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育}| {bcksports}| {bck官网}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育}| {bckbet}| {bcksports}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bck体育}| {bckbet}| {bck官网}| {bck}| {bck体育官网}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bcksports}| {bck官网}| {bck}| {bck体育官网}| {bcksports}| {bck体育下载}| {bck体育app}| {bckbet}|
{uc8}| {uc8体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐城}| {uc8彩票}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8老虎机}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8老虎机}| {uc8彩票}| {uc8}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {uc8彩票}| {uc8}| {uc体育}| {UC体育}| {UC8娱乐城}| {uc8}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {uc8}| {uc体育}| {uc8体育}| {UC体育}| {uc8官网}| {uc8老虎机}| {UC8娱乐}| {UC8娱乐城}|